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实验室危险物质及处理方法--EBEBEthidium bromide，溴化乙锭

时间：2015年12月22日信息来源：湘智离心机字体：大中小【打印此页】

溴化乙锭是一种高度灵活的荧光染色剂，用于察看琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。溴化乙锭用规范302nm 紫外光透射仪激起并放射出橙红色信号，察看琼脂糖凝胶中DNA最常用的办法是应用荧光染料溴化乙锭停止染色，溴化乙锭含有一个能够嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的分离简直没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中，大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后，其平面基团与螺旋的轴线垂直并经过范德华力与上下碱基互相作用。这个基团的固定位置及其与碱基的亲密接近，招致与DNA分离的染料呈现荧光，其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。DNA吸收254nm处的紫外辐射并传送给染料，而被分离的染料自身吸收302nm和366nm的光辐射。这两种状况下，被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。由于溴化乙锭-DNA复合物的荧光产率比没有分离DNA的染料高出20-30倍，所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭（0.5ug/ml）时，能够检测到少至10ng的NDA条带。溴化乙锭能够嵌入碱基分子中，招致错配。溴化乙锭是强诱变剂，具有高致癌性！会在60－70度是蒸发（所以最好不要在胶太热的时分加，或者应该加到液体里，0.5ug/ml，染色半小时）（当EB加得过多时，也能够在室温用水将已染色的凝胶浸泡20min以降低未分离的EB惹起的背景荧光）。
溴化乙锭溶液的净化处置：由于溴化乙锭具有一定的毒性，实验完毕后，应对含EB的溶液停止净化处置再行弃置，以防止污染环境和危害人体安康。

（1）关于EB含量大于0.5mg/ml的溶液，可如下处置：
①将EB溶液用水稀释至浓度低于0.5mg/ml；
②参加一倍体积的0.5mol/L KMnO4，混匀，再参加等量的25mol/L HCl，混匀，置室温数小时；
③参加一倍体积的2.5mol/L NaOH，混匀并废弃。

（2）EB含量小于0.5mg/ml的溶液可如下处置：
① 按1mg/ml的量参加活性炭，不时轻摇混匀，室温放置1小时；
② 用滤纸过滤并将活性碳与滤纸密封后丢弃

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